2 × PCR Super Mix (mei kleurstof)
2 × PCR Master Mix befettet Taq DNA Polymerase, dNTP's, en oare PCR-easke komponinten.De Master Mix is stabyl foar 3 moannen by 4 ℃ mei ús oanpaste stabilisatoren.De oplossing foar pre-mix is optimalisearre foar konvinsjonele PCR en klear om te brûken troch it tafoegjen fan DNA-sjabloan en primers.De PCR-produkten kinne direkt laden wurde foar elektroforese mei pre-laden bromophenol blauwe kleurstof.De fersterke produkten befetsje 3 '-dA-protrusion en kinne maklik wurde klone yn T-vektor.De 2 × PCR Master Mix simplifies PCR proseduere en ferminderet fersmoarging.
Storage Betingsten
Produkten moatte wurde opslein by -25 ℃ ~ -15 ℃ foar 2 jier.
Spesifikaasjes
Fidelity (vs. Taq) | 1× |
Hot Start | No |
Overhang | 3'-A |
Polymerase | Taq DNA Polymerase |
Reaksje Format | SuperMix of Master Mix |
Reaksje snelheid | Standert |
Produkt Type | PCR Master Mix (2x) |
Ynstruksjes
1.Reaksje Systeem
Components | Folume(μL) |
Template DNA | Geskikt |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | oan 50 |
2.Amplification Protokol
Cycle stappen | Temperatuer (°C) | Tiid | Cycles |
Inisjele denaturaasje | 94 | 5 min | 1 |
Denaturaasje | 94 | 30 sek | 35 |
Annealing | 50-60 | 30 sek | |
Útbou | 72 | 30-60 sek/kb | |
Finale útwreiding | 72 | 10 min | 1 |
Noat:
1) Sjabloangebrûk: 50-200ng genomysk DNA;0.1-10ng plasmide DNA.
2) Mg2+konsintraasje: Dit produkt befettet 3mM MgCl2, geskikt foar de measte PCR reaksjes.
3) Annealing temperatuer: Ferwize asjebleaft nei de teoretyske Tm wearde fan primers.De annealing temperatuer kin wurde ynsteld op 2-5 ℃ leger as de teoretyske wearde fan de primer.
4) Utwreidingstiid: Foar molekulêre identifikaasje wurdt 30 sek / kb oanrikkemandearre.Foar gen-kloning wurdt 60 sek/kb oanrikkemandearre.
Notysjes
1.PCR produkten mei 2 × PCR Master Mix binne net geskikt foar polyacrylamide gel electrophoresis.
2.Foar jo feiligens en sûnens, drage asjebleaft labjassen en wegwerphandschoenen foar operaasje.
3.It wurdt allinich brûkt foar ûndersyksgebrûk!