Bst 2.0 DNA Polymerase (Glycerol frij, hege tichtheid)
Bst DNA polymerase V2 is ôflaat fan Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, dy't 5′→3′ DNA-polymerase-aktiviteit en sterke ketenferfangingsaktiviteit hat, mar gjin 5′→3′ exonuclease-aktiviteit.Bst DNA Polymerase V2 is by útstek geskikt foar strand-ferpleatsing, isothermyske amplifikaasje LAMP (Loop mediated isothermal amplification) en rappe sequencing.Dizze Bst DNA-polymerase V2 is yn steat om DNA-polymerase-aktiviteit by keamertemperatuer te ynhiberjen, sadat it kin wurde eksploitearre en it reaksjesysteem kin wurde formulearre by keamertemperatuer, it foarkommen fan net-spesifike amplifikaasje en it ferbetterjen fan de effisjinsje fan 'e reaksje, en dizze ferzje kin lyofilisearre wurde.Derneist is it yn steat om syn aktiviteit by ferhege temperatueren frij te litten, sadat de needsaak foar in aparte aktivearringstap elimineert.
Components
| Komponint | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polymerase V2 (glycerolfrij) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10 × HC Bst V2 Buffer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Oanfraach
1.LAMP isotermyske amplifikaasje
2.DNA-streng single displacement reaksje
3.Hege GC-gensekwinsje
4.DNA-sekwinsje fan nanogramnivo.
Storage Condition
Ferfier ûnder 0 ° C en wurde opslein by -25 ° C ~ -15 ° C.
Unit Definition
Ien ienheid wurdt definiearre as de hoemannichte enzyme dy't 25 nmol dNTP yn 30 minuten by 65 ° C yn soer ûnoplosber materiaal opnimt.
LAMP Reaksje
| Components | 25 μLSysteem |
| 10 × HC Bst V2 Buffer | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTP's (10 mM elk) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Grien (25×)a | 1,0 μL |
| Primer mixb | 6 μl |
| Bst DNA Polymerase V2 (glycerolfrij) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Sjabloan | × μL |
| ddH₂O | Oant 25 μL |
Notysjes:
1) a.SYTOTM 16 Grien (25 ×): Neffens eksperimintele behoeften kinne oare kleurstoffen brûkt wurde as ferfangers;
2) b.Primermix: krigen troch it mingen fan 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB en oare folumes.
Reaksje en betingst
1 × HC Bst V2 Buffer, de ynkubaasjetemperatuer is tusken 60 ° C en 65 ° C.
Heat Inactivation
80°C, 20 min.
