One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Cat No: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOAR FAST) is in probe-basearre RT-qPCR snelle detection kit geskikt foar single-plex of multiplex kwantitative PCR mei RNA as sjabloan (lykas RNA firus).Dit produkt brûkt in nije generaasje fan antybody-modifisearre Taq DNA Polymerase en ien-stap tawijd Reverse Transcriptase, mei in optimalisearre buffer foar rappe amplifikaasje, dy't flugger amplifikaasjesnelheid hat, hegere amplifikaasje-effisjinsje en spesifisiteit.It stipet lykwichtige amplifikaasje yn sawol single-plex as multiplex fan samples mei lege en hege konsintraasje yn koarte tiid.
Components
1. 5 × RT-qPCR buffer (U+)
2. Enzymmix (U+)
Notysjes:
in.5 × RT-qPCR-buffer (U+) omfettet dNTP en Mg2+;
b.Enzymmix (U+) omfettet reverse transkriptase, Hot Start Taq DNA-polymerase, RNase-inhibitor en UDG;
c.Brûk RNase-Free tips, EP-buizen, ensfh.
Foardat gebrûk, mingje de 5 × RT-qPCR-buffer (U+) yngeand.As der in delslach is nei it ûntjaan, wachtsje oant de buffer weromkomt nei keamertemperatuer, mingje en oplosse, en brûk se dan normaal.
Storage Betingsten
It produkt wurdt ferstjoerd mei droech iis en kin wurde opslein by -25 ~ -15 ℃ foar 1 jier.
Ynstruksjes
1. Reaksje Systeem
| Components | Volume (20 μL reaksje) |
| 2 × RT-qPCR buffer | 4 μl |
| Enzymmix (U+) | 0.8μL |
| Primer Foarút | 0.1~ 1.0μM |
| Primer Reverse | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05~0.25μM |
| Sjabloan | X μL |
| RNase-frij wetter | oant 25μL |
Opmerkingen: Reaksjevolume is 10-50μL.
2. Fytsprotokol (Standard)
| Syklus stap | Temp. | Tiid | Cycles |
| Omkearde transkripsje | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Inisjele denaturaasje | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
| Denaturaasje | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Annealing / Extension | 60 ℃ | 30 sek |
| Cycling Protokol (Fluch) Syklus stap |
Temp. |
Tiid |
Cycles |
| Omkearde transkripsje | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Inisjele denaturaasje | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturaasje | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Annealing / Extension | 60 ℃ | 10 s |
Notysjes:
in.Reverse transkripsjetemperatuer is tusken 50 ℃ oant 60 ℃, it fergrutsjen fan de temperatuer helpt om komplekse struktueren en sjabloanen mei hege CG-ynhâld te fersterkjen;
b.De optimale annealing temperatuer moat wurde oanpast basearre op de Tm wearde fan de primer, en selektearje de koartste tiid foar fluorescence sinjaal kolleksje basearre op de Real Time PCR ynstrumint.
Notysjes
Draach asjebleaft de nedige PPE, sa'n laboratoariumjas en wanten, om jo sûnens en feiligens te garandearjen!
