RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Dit produkt befettet reaksje buffer, RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase en waarmte-resistant reverse transkriptase), lyophilized Protectants en chromogenic kleurstof komponinten.Om te brûken, gewoan brûke Buffer, de reaksje enzyme en primer wurde mingd en tafoege oan it sjabloan;tafoegjen fan lyophilized protectant kin wêze rjocht.It waard ferbûn mei in lyophilizer en lyophilized, en allinnich de primers en sjabloanen waarden tafoege doe't brûkt.Dit kit soarget foar in flugge, dúdlike fisuele opspoaren fan amplification, hokker negative reaksje wurdt oanjûn yn read en positive reaksje wurdt oanjûn troch in feroaring yn giel.
Komponint
| Komponint | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Loop-mediated Amplification Buffer (mei kleurstof) | 0,96 ml | 4,80 mL×2 | 9,60 mL×10 |
| RT-Enzymes Mix | 270 μL | 2,70 mL | 2,70 mL×10 |
| Lyophilized beskermjende | 0,96 mL×2 | 9,60 mL×2 | 9,60 mL×20 |
Oanfraach
Foar isothermyske amplifikaasje fan DNA of RNA.
Storage Betingsten
Ferfierd mei droech iis, opslein by -25 ~ -15 ℃.Foarkom faak freeze-thaw, it produkt is jildich foar 12 moannen.
Protokol
1.Taai de reaksjebuffer om te brûken by keamertemperatuer.Vortex koart of keare buizen ferskate kearen om yngeand te mingjen, dan sintrifuge om de flüssigens oan 'e boaiem fan' e buis te sammeljen.
2.Tarieding fan reaksje systeem.Dit reagens kin wurde taret yn twa reaksjesystemen, floeibere reaksjemix en lyofilisearre systeemmix.
1) Tariede floeibere reaksje mix
| Komponint | Folume |
| Loop-mediated Amplification Buffer (mei kleurstof) | 10 μL |
| RT-Enzymes Mix | 2,8 μL |
| 10 × Primer Mixa | 5 μl |
| Templates DNA / RNA b | × μL |
| Nuclease-frij wetter | Oant 50 μL |
2) Lyophilization systeem mix
① Tariede lyofilisearre miks
| Komponint | Folume |
| Loop-mediated Amplification Buffer (mei kleurstof) | 10 μL |
| Lyophilized beskermjende | 20 μL |
| RT-Enzymes Mix | 2,8 μL |
| Nuclease-frij wetter | Oant 50 μL |
② Lyophilization: De tariede Mix waard lyophilized yn in 50μL systeem
③ Reaksjemix tariede
| Komponint | Folume |
| Lyophilized mix | 1 stik |
| 10 × Primer Mixa | 5 μl |
| Templates DNA / RNA b | × μL |
| Nuclease-frij wetter | Oant 50 μL |
Notysjes:
1) a.10 × Primer Mix: 16 μM FIP / BIP, 2 μM F3 / B3, 4 μM Loop F / B;
2) b.DEPC (wetteroplosber) wurdt oanrikkemandearre foar nucleic acid templ.
1.Inkubearje by 65 ° C foar 30-45 minuten, dat kin wurde ferlingd neffens kleurferoaring Reaksjetiid.
2.Neffens it bleate each wie giel posityf en read negatyf.
Notysjes
1.Sâlt kin ferskine yn 'e boaiem fan' e buffer buis, vortex koart of invert buizen ferskate kearen te mix yngeand by keamertemperatuer.
2.De reaksjetemperatuer kin wurde optimalisearre tusken 62 ℃ en 68 ℃ neffens de tastân fan primers.
3.De ferpakte reagentia moatte net foar in lange tiid bleatsteld wurde oan loft.
4.De reade en giele ferkleuringsreaksje is ôfhinklik fan 'e pH-feroaring fan it reaksjesysteem, brûk asjebleaft de befetsjende Tris-nukleïnezuuropslachoplossing net, oanrikkemandearre om ddH te brûken2O opslein nucleic acid;
5.It eksperimint moat wurde standerdisearre, ynklusyf de tarieding fan it reaksje systeem, lyophilization, en sample ferwurkjen en sample taheakjen proses;
6.Om foar te kommen fersmoarging, is it oan te rieden om tariede de reaksje systeem yn in ultra-skjinne bankje, yn oare Add sjabloanen oan 'e dampkap fan' e keamer om foar te kommen falske positive ynterferinsje.
