Ien stap RT-qPCR SYBR Green Premix
Cat No: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix is foar fluorescence kwantifikaasje basearre op SYBR Green I kleurstof.Mei help fan gen-spesifike primers, reverse transkripsje en qPCR-reaksjes wurde foltôge yn ien buis, elimineren de needsaak foar werhelle cap-iepening en pipetting operaasjes, sterk ferbetterjen assay effisjinsje en ferminderjen it risiko fan fersmoarging.Foar RNA-monsters brûkt de kit waarmtebestindige Reverse Transcriptase foar effisjinte cDNA-synteze en HotStart Taq DNA-polymerase foar kwantitative amplifikaasje.Under it optimisearre buffersysteem kin de gefoelichheid fan 'e kit sa heech wêze as 0.1 pg foar tige útdrukte doelen en sa heech as 1 pg foar matig útdrukte doelen.De kit is geskikt foar de amplifikaasje en kwantifikaasje fan DNA-monsters.It makket de gefoelige deteksje en kwantifikaasje fan nukleïnesoeren mooglik fan ferskate plant- en diermonsters, sellen en mikro-organismen.
Components
| No | Namme | Folume | Folume |
| 1 | Avansearre buffer | 250 μL | 2×1,25 ml |
| 2 | Avansearre Enzyme Mix | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Free H2O | 250 μL | 2×1,25 ml |
Storage Betingsten
Dit produkt moat wurde opslein by -25 ~ -15 ℃ fuort fan ljocht foar 1 jier.
Ynstruksjes
1.Reaction systeem konfiguraasjed
| Components | Volume (μL) | Volume (μL) | Finale konsintraasje |
| Avansearre buffer | 12.5 | 25 | 1× |
| Avansearre Enzyme Mix | 1 | 2 | - |
| Foarút Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0,2 μmol/L |
| Reverse Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0,2 μmol/L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Free H2Oc | oan 25 | oan 50 | - |
Notysjes:
1) a.TDe definitive primerkonsintraasje wie 0,2 μmol / L, dy't ek oanpast wurde koe tusken 0,1 en 1 μmol / L as passend.
2) b.It reagens is ekstreem gefoelich, mei Totaal RNA yn it berik fan 1pg-1μg, en testen fan minsklike samples lieten in optimale ynfier fan 1 pg-100 ng sjen, kontrolearje foar in totale Ct-wearde yn it berik fan 15-30 as passend.
3) c.It wurdt oanrikkemandearre om 20μL of 50μL te brûken om de jildigens en reprodusearberens fan doelgenamplifikaasje te garandearjen.
4) d.Tariede asjebleaft yn 'e ultra-skjinne bankje en brûk nuklease-residufrije tips en reaksjebuizen;tips mei filterpatronen wurde oanrikkemandearre.Foarkom krúskontaminaasje en aerosolkontaminaasje.
2.Reaksje programma
| Cycle stap | Temp. | Tiid | Cycles |
| Omkearde transkripsje | 50 ℃a | 6 mins | 1 |
| Inisjele denaturaasje | 95 ℃ | 5 mins | 1 |
| Amplification reaksje | 95 ℃ | 15 sek | 40 |
| 60 ℃b | 30 sek | ||
| Melting curve stage | Instrument Standerts | 1 | |
Notysjes:
1) a.De omkearde transkripsjetemperatuer kin wurde selektearre tusken 50-55 ° C neffens de eksperimintele behoeften.Foar DNA-monsters kin it omkearde transkripsjeproses weilitten wurde.
2) b.Yn spesjale gefallen kin de annealing / extension temperatuer oanpast wurde neffens de primer Tm wearde, 60 ° C wurdt oanrikkemandearre.
Notysjes
1. Dit produkt is allinich foar ûndersyksgebrûk.
2. Operearje asjebleaft mei labjassen en wegwerphandschoenen, foar jo feiligens.
