Multiplex Ien Stap RT-qPCR Premix-UNG
Cat No: HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) is in multiplex kwantitative PCR kit basearre op RNA as sjabloan.Yn it proses fan it eksperimint waarden omkearde transkripsje en kwantitative PCR yn deselde buis útfierd, wat de eksperimintele operaasje ferienfâldige en it risiko fan kontaminaasje fermindere.Yn dizze kit waard de earste strân cDNA effisjint synthesized troch waarmte-resistant Reverse Transcriptase en kwantitatyf fersterke troch HotStart Tag DNA Polymerase.De kit befettet benammen optimalisearre MP buffer, enzymen mix, ensfh De buffer oplossing al befettet Mg2+en dNTP.Dêrnjonken wurde de faktoaren tafoege dy't de net-spesifike PCR-amplifikaasje effektyf kinne remme en de amplifikaasje-effisjinsje fan meardere qPCR-reaksjes ferbetterje, dy't de amplifikaasje-effisjinsje kinne garandearje en oant meardere amplifikaasjereaksje kinne útfiere.It dUTP / UDG-systeem waard tafoege om it risiko fan aerosolkontaminaasje effektyf te foarkommen.
Components
1. Buffer
2. Enzym Mix
Spesifikaasje
| Hot Start | Ynboude hot start |
| Detection metoade | Primer-probe-deteksje |
| PCR metoade | Ien stap RT-qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymerase |
| Soart sample | DNA |
Storage Betingsten
It produkt wurdt ferstjoerd mei droech iis en kin wurde opslein by -25 ~ -15 ℃ foar 1 jier.It moat foarkomme faakfreeze-thaw.It is oan te rieden om apart te bewarjen.
Ynstruksjes
1.Reaksje Systeem
| Components | Volume (μL) | Finale konsintraasje |
| 2 × MP Buffer | 12.5 | 1× |
| Enzymmix | 1 | - |
| Primer/probemix (2,5 μM) | 3 | 0.3μM |
| Template RNA | 1-10 | - |
| RNase Free H2O | oan 25 | - |
Notysjes:
Wês wis dat jo goed mingje foardat jo gebrûk meitsje, foarkomme oermjittige bubbels feroarsake troch gewelddiedige trilling.
in.Primer konsintraasje: Primer mix ynklusyf multiplex primer, ôfhinklik fan de situaasje optimale primer konsintraasje miskien tusken 0.l en 1.0μM.
b.Probe konsintraasje: Probe mix ynklusyf multiplex probe labeling ferskil fluorescent groep, ôfhinklik fan de situaasje optimale probe konsintraasje miskien tusken 0.05 en 0.5μM.
c.Template-ferdunning: qPCR is heul gefoelich en it is oan te rieden om it sjabloan te verdunnen.De kontrôle Ct wearde is geskikt tusken 20 en 35.
d.Systeem tarieding: Tariede asjebleaft yn 'e ultra skjinne wurktafel, en pipettor en reaksjebuis sûnder nuklease-residu;It is oan te rieden om de pistoalkop mei filterelemint te brûken.Foarkom krúskontaminaasje en aerosolkontaminaasje.
2. Optimalisearre CyclingProtokol
| Syklus stap | Temp. | Tiid | Cycles |
| Omkearde transkripsje | 50 ℃in | 20 min | 1 |
| Initial-denaturaasje | 95 ℃ | 5 mins | 1 |
| Amplification reaksje | 95 ℃ | 15 sek |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30 sek c |
Notysjes:
in.Omkearde transkripsje: De temperatuer kin 42 °C of 50 °C selektearje.
b.Amplification reaksje: De temperatuer wurdt oanpast neffens de Tm wearde fan de ûntwurpen primers.
c.Fluorescence sinjaal oanwinst: Stel asjebleaft de eksperimintele proseduere yn neffens de easken fan 'e ynstruminthantlieding.
Notysjes
Draach asjebleaft de nedige PPE, lykas labjas en wanten, om jo sûnens en feiligens te garandearjen.
