Virale DNA / RNA Extraction Kit
Dizze kit is geskikt foar de rappe ekstraksje fan virale DNA / RNA mei hege suverens út samples lykas nasopharyngeale swabs, miljeu-swabs, selkultuer-supernatanten en weefselhomogenate supernatanten.De kit is basearre op silika membraan suvering technology dy't elimineert de needsaak foar it brûken fan fenol / chloroform organyske solvents of tiidslinend alkohol delslach te extract virale DNA / RNA fan hege kwaliteit.De krigen nukleïnesoeren binne frij fan ûnreinheden en klear foar gebrûk yn streamôfwerts eksperiminten lykas omkearde transkripsje, PCR, RT-PCR, real-time PCR, folgjende-generaasje sequencing (NGS), en Northern blot.
Opslach betingsten
Bewarje by 15 ~ 25 ℃, en ferfiere by keamertemperatuer
Components
| Components | 100RXNS |
| Buffer VL | 50 ml |
| Buffer RW | 120 ml |
| RNase-frije ddH2 O | 6 ml |
| FastPure RNA-kolommen | 100 |
| Sammelbuizen (2ml) | 100 |
| RNase-frije kolleksje buizen (1,5 ml) | 100 |
Buffer VL:Biede in omjouwing foar lysis en bining.
Buffer RW:Fuortsmite oerbleaune aaiwiten en oare ûnreinheden.
RNase-frije ddH2O:Elute DNA / RNA út it membraan yn de spin kolom.
FastPure RNA-kolommen:Spesifyk adsorbearje DNA / RNA.
Sammelbuizen 2 ml:Filtraat sammelje.
RNase-frije kolleksje buizen 1,5 ml:Sammelje DNA / RNA.
Oanfraach
Nasopharyngeale swabs, miljeu swabs, selkultuer supernatanten, en weefsel homogenate supernatanten.
Self-tariede Materials
RNase-frije pipette tips, 1,5 ml RNase-frije centrifuge buizen, centrifuge, vortex mixer, en pipetten.
Eksperimint Proses
Fier alle folgjende stappen út yn in biofeiligenskabinet.
1. Foegje 200 μl fan 'e stekproef oan in RNase-frije sintrifugebuis (oanmeitsje mei PBS of 0,9% NaCl yn gefal fan net genôch sample), add 500 μl fan Buffer VL, mingje goed troch vortexing foar 15 - 30 sek, en sintrifugerje koart te sammeljen it mingsel oan 'e boaiem fan' e buis.
2. Plak FastPure RNA Columns yn in samling Tubes 2 ml.Oerstapje it mingsel fan stap 1 nei FastPure RNA Columns, sintrifugerje by 12.000 rpm (13.400 × g) foar 1 min, en smyt it filtraat.
3. Foegje 600 μl fan Buffer RW oan FastPure RNA Columns, sintrifuge by 12.000 rpm (13.400 × g) foar 30 sekonden, en ferwiderje it filtraat.
4. Werhelje stap 3.
5. Centrifugerje de lege kolom by 12.000 rpm (13.400 × g) foar 2 min.
6. Ferpleatse FastPure RNA Columns foarsichtich yn in nije RNase-frije kolleksjebuizen 1.5 ml (fersoarge yn 'e kit), en foegje 30 - 50 μl RNase-frije ddH2O ta oan it sintrum fan it membraan sûnder de kolom te berikken.Lit stean by keamertemperatuer foar 1 min en centrifuge by 12.000 rpm (13.400 × g) foar 1 min.
7. Discard FastPure RNA Columns.It DNA / RNA kin direkt brûkt wurde foar folgjende assays, of opslein by -30 ~ -15 ° C foar in koarte perioade of -85 ~ -65 ° C foar in langere perioade.
Notysjes
Allinich foar ûndersyksgebrûk.Net foar gebrûk yn diagnostyske prosedueres.
1. Equilibrate samples nei keamertemperatuer foarôf.
2. Firussen binne tige besmetlik.Soargje derfoar dat alle nedige feiligensmaatregels wurde nommen foardat it eksperimint is.
3. Avoid werhelle freezing en thawing fan it stekproef, as dit kin liede ta degradaasje of redusearre opbringst fan de ekstrahearre virale DNA / RNA.
4. Self-prepared apparatuer omfiemet RNase-frije pipette tips, 1,5 ml RNase-frij centrifuge buizen, centrifuge, vortex mixer, en pipetten.
5. By it brûken fan de kit, drage in laboratoariumjas, wegwerp latekshandschoenen en in wegwerpmasker en brûk RNase-frije verbruiksartikelen om it risiko fan RNase-kontaminaasje te minimalisearjen.
6. Fiere alle stappen by keamertemperatuer útsein as oars oantsjutte.
Mechanisme en wurkflow
