Poly A Carrier RNA

Cat No: HC4001A

Poly A, polyadenylate, is in mingsel fan 100 ~ 10000 polyadenylates, dat wurdt polymerisearre troch polynucleotide phosphorylase in vitro.Yn vivo wurdt poly (a) tafoege oan 'e 3-terminal fan mRNA troch enzyme om de stabiliteit fan mRNA te ferbetterjen.By it tapassen fan nukleïnesûrekstraksje kin it tafoegjen fan poly A oan 'e lysate of binende oplossing de opbringst fan DNA en RNA ferbetterje.It meganismefan poly A ferbetterjen fan de opbringst fan nucleic acid is as folget:

1. Saturated kontakt mei it oerflak adsorption fan artikels.De measte polypropylene artikels hawwe statyske elektrisiteit op it oerflak, dat sil adsorbearje nucleic soeren.Carrier RNA kin dizze sêdzjeadsorpsjonseffekten en ferminderje it ferlies fan doelnukleinsoeren.

2. Inactivate trace nucleases: Der binne ferskate nucleases yn biologyske samples enmiljeu.Poly A kin inactivate trace nucleases yn de ekstraksje of behâld stappen neiferbetterje de opbringst en stabiliteit fan doelnukleinsoeren.

3. Coprecipitation: Yn 'e nukleïnesûrreinigingsstap fan alkohol bemiddele delslach of bining, kin poly A mei it doelnukleinsûre coprecipitearje of polymere dieltsjes foarmje omferbetterje it herstel.

Gebrûk metoade

Nim in passende hoemannichte lyofilisearre poeder, add DEPC behannele wetter of guanidine sâlt oplossing oanoplosse it yn 0.1-1ug / uL, en dan sub-pack it en bewarje it by -20 ° C.

Oanfraach

1.Virus DNA / RNA-ekstraksje: it tafoegjen fan 1-5ug Carrier RNA oan 'e lysate kin de opbringst fan RNA / DNA ferbetterje, it doelnukleinsûr stabilisearje en de degradaasje fan' e suvere nukleinsäure by opslach foarkomme.

2. Yn 'e mikro-DNA / RNA-ekstraksje troch kolommembraanmetoade (<1ug), it tafoegjen fan drager-RNA oan 1-5ug is befoarderlik foar it ferbetterjen fan de opbringst fan nukleinsäure.

3. Yn 'e alkohol mediated nucleic acid delslach en konsintraasje stap, de tafoeging fan 1-2ug carrier RNA is nuttich foar it ferbetterjen fan it herstel fan koarte segmint RNA.

4. Yn 'e kwantitative probe PCR-reaksje-oplossing is it tafoegjen fan 10-100ng drager-RNA oan' e reaksje-oplossing nuttich om de gefoelichheid te ferbetterjen en de C te ferminderjen_Twearde.