Ultra Nuclease GMP-graad
Cat No: HC2016A
UltraNuclease GMP-graad wurdt útdrukt en suvere yn Escherichia coli (E.coli) troch genetysk manipulearre en taret ûnder de GMP-omjouwings.It kin ferminderjen de viscosity fan sel supernatant en sel lysate yn wittenskiplik ûndersyk, fergrutsje proteïne suvering effisjinsje en ferbetterje proteïne funksjoneel ûndersyk.It produkt kin ek host-nukleïnezuurresiduen ferminderje nei pg-graad, it ferbetterjen fan de prestaasjes en feiligens fan biologyske produkten fan tapassingen, ynklusyf firussuvering, faksinproduksje, en farmaseutyske fabrikaazje fan proteïne / polysaccharide.Neist, it produkt kin ek wurde tapast om it clumping fan minsklike perifeare bloed mononuclear sellen (PBMC) te foarkommen yn sel terapy en faksin ûntwikkeling.
UltraNuclease wurdt levere yn 'e foarm fan in sterilisearre reagens, eluearre yn buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerine), mei it uterlik fan in kleurleaze, transparante floeistof.Dit produkt wurdt produsearre troch GMP proses easken en levere yn in floeibere foarm.
Components
UltraNuclease GMP-graad (250 U/μL)
Storage Betingsten
It produkt wurdt ferstjoerd mei droech iis en kin wurde opslein by -25 ℃ ~ -15 ° C foar twa jier.
As it produkt wurdt iepene en is opslein by 4 ℃ foar mear as in wike, wy riede filterjenit produkt om mikrobiële kontaminaasje te foarkommen.
Spesifikaasjes
| Ekspresje Host | Rekombinante E. coli mei UltraNuclease gen |
| Molekuul gewicht | 26,5 kDa |
| soelectric punt | 6.85 |
| Purity | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Opslachbuffer | 20 mM Tris-HCL pH 8.0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerine |
|
Unit Definition | De definysje fan ien Activity Unit (U) is de hoemannichte enzyme brûkt omferoarje de absorption wearde fan ΔA260 troch 1.0 yn 30 minuten yn in 2. 625 mLreaksjesysteem by 37 ℃ mei in pH fan 8.0 (lykweardich oan folsleine spiisfertarring fan37 μg salm sperma DNA yn oligonucleotides). |
Ynstruksjes
1. Sample Samling
Oanhingjende sellen: ferwiderje it medium, waskje de sellen mei PBS, en ferwiderje de supernatant.
Suspensionsellen: sammelje de sellen troch sintrifugaasje, waskje de sellen mei PBS, sintrifugerje by 6.000rpm foar 10 min, sammelje de pellet.
Escherichia coli: sammelje de baktearjes troch sintrifugaasje, waskje ien kear mei PBS, sintrifugerje op 8.000rpm foar 5 min, en sammelje de pellet.
2. Sample Treatment
Behannelje de sammele selpellets mei lysisbuffer yn 'e ferhâlding fan massa (g) oant folume (mL) 1: (10-20), of troch meganyske of gemyske metoaden op iis of by keamertemperatuer (1g selpellet befettet sawat
109 sellen).
3. Enzyme behanneling
Foegje 1-5mM MgCl ta oan it reaksjesysteem en oanpasse de pH nei 8-9.
Foegje UltraNuclease ta neffens de ferhâlding fan 250 ienheden om 1 g selpellets te fertarren, ynkubearje by 37 ℃ foar mear dan 30 minuten.Ferwize asjebleaft nei it formulier "Oanrikkemandearre reaksjetiid" om dedoer fan 'e behanneling.
4. Supernatant Samling
Centrifugerje by 12.000 rpm foar 30 minuten en sammelje de supernatant.
Opmerking: As de oplossing is soer of alkaline, of befettet hege konsintraasjes fan sâlt, detergents, ofdenaturanten, ferheegje asjebleaft de enzymdosis of ferlingje de behannelingtiid dienlik.
Oanrikkemandearre reaksje conditions
| Parameter | Optimale betingst | Effektive betingst |
| Mg²+Konsintraasje | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatuer | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT konsintraasje | 0-100 mM | >0 mM |
| Mercaptoethanol konsintraasje | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalente kationkonsintraasje | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfaat lon Konsintraasje | 0-10 mM | 0-100 mM |
Oanrikkemandearre Reaksje Tiid (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease-bedrach (finale konsintraasje) | Réaksjetiid |
| 0,25 U/ml | >10 h |
| 2,5 U/ml | >4 h |
| 25 U/ml | 30 min |
Notysjes:
Draach asjebleaft de nedige PPE, sa'n laboratoariumjas en wanten, om jo sûnens en feiligens te garandearjen!
