Rinne A
Ribonuclease A (RNaseA) is in single-stringed polypeptide mei 4 disulfide obligaasjes mei in molekulêre gewicht fan likernôch 13,7 kDa.RNase Ais in endoribonuklease dy't spesifyk ienstrengige RNA degradearret by C- en U-resten.Spesifyk herkent de spalting de fosfodiesterbân foarme troch de 5'-ribose fan in nukleotide en de fosfaatgroep op 'e 3'-ribose fan it neistlizzende pyrimidine-nukleotide, sadat de 2,3'-Cyclic fosfaten wurde hydrolysearre nei de oerienkommende 3 'nukleosidefosfaten (bgl. pG-pG-pC-pA-pG wurdt spjalt troch RNase A om pG-pG-pCp en A-PG te generearjen).RNase A is it meast aktyf yn it spjalten fan ienstrengige RNA.Oanrikkemandearre wurkkonsintraasje is 1- 100 μ G / ml, kompatibel mei ferskate reaksjesystemen.Lege sâltkonsintraasje (0-100 mM NaCl) kin brûkt wurde om single-strâne RNA, dûbele strâne RNA, en RNA-keatlingen foarme troch RNA-DNA-hybridisaasje te snijen.
By hege sâltkonsintraasje (≥0.3 M) knipt RNase A lykwols allinich spesifyk ienstrengige RNA.
RNase A wurdt meast brûkt om RNA te ferwiderjen by de tarieding fan plasmid DNA as genomysk DNA.Of DNase aktyf is tidens it tariedingsproses of net, kin de reaksje maklik beynfloedzje.De tradisjonele metoade fan siedend yn in wetterbad kin brûkt wurde om DNase-aktiviteit te ynaktivearjen.Dit produkt befettet gjin DNase en protease, en fereasket gjin waarmtebehandeling foar gebrûk.Derneist kin dit produkt ek brûkt wurde yn molekulêre biologyske eksperiminten lykas RNase-beskermingsanalyse en RNA-sekwinsjeanalyse.
Opslach betingsten
It produkt moat wurde opslein by -25 ℃ ~ - 15 ℃ foar 2 jier.
Spesifikaasjes
| Ferskining | Poeder |
| Kwantiteit | 100mg / 1g |
| Produkt type | RNase A |
Ynstruksjes
Dit is ien fan 'e mienskiplike metoaden foar it tarieden fan RNase A opslachoplossing.It kin ek wurde tarettroch oare metoaden neffens de tradisjonele metoaden yn it laboratoarium of referinsjeliteratuer (lykasdirekt oplost yn 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 of Tris-NaCl-oplossing)
1. Brûk 10 mM natriumacetat (pH 5.2) om 10 mg / mL fan RNase A opslachoplossing te meitsjen.
2. Ferwaarming op 100 ℃ foar 15 min.
3. Koel nei keamertemperatuer, foegje 1/10 folume fan 1 M Tris-HCl (pH 7.4) ta, oanpasse de pH nei 7.4 (foarbygelyks, add 500 mL fan 10 mg / mL RNase opslach oplossing 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. Sub-ferpakt by -20 ℃ foar beferzen opslach, dy't stabyl kin wêze oant 2 jier.
[Opmerkingen]:
By siedende RNaseA-oplossing ûnder neutrale omstannichheden sil RNase-neerslach foarmje;Kook it op in legere pH, en as der delslach is, kin it wurde waarnommen, wat kin wurde feroarsake troch de oanwêzigens fan proteïne ûnreinheden.As sedimint wurdt fûn nei siedende, ûnreinheden kinne fuortsmiten wurde troch hege-snelheid centrifugation (13000rpm), en dan sub-packed foar freezing opslach.
Notysjes
Draach asjebleaft de nedige PPE, sa'n laboratoariumjas en wanten, om jo sûnens en feiligens te garandearjen.
