Rinne A
Ribonuclease A (RNaseA) is in single-stringed polypeptide mei 4 disulfide obligaasjes mei in molekulêre gewicht fan likernôch 13,7 kDa.RNase A is in endoribonuklease dy't spesifyk ienstrengige RNA degradearret by C- en U-resten.Spesifyk herkent de spalting de fosfodiesterbân foarme troch de 5'-ribose fan in nukleotide en de fosfaatgroep op 'e 3'-ribose fan it neistlizzende pyrimidine-nukleotide, sadat de 2, 3'-Cyclyske fosfaten wurde hydrolysearre nei de oerienkommende 3 ′nukleosidefosfaten (bgl. pG-pG-pC-pA-pG wurdt spjalt troch RNase A om pG-pG-pCp en A-PG te generearjen).RNase A is it meast aktyf yn it spjalten fan ienstrengige RNA.Oanrikkemandearre wurkkonsintraasje is 1-100μG / ml, kompatibel mei ferskate reaksjesystemen.Lege sâltkonsintraasje (0-100 mM NaCl) kin brûkt wurde om single-strâne RNA, dûbele strâne RNA, en RNA-keatlingen foarme troch RNA-DNA-hybridisaasje te snijen.By hege sâltkonsintraasje (≥0.3 M), spjaltet RNase A lykwols allinich spesifyk ienstrengige RNA.
RNase A wurdt meast brûkt om RNA te ferwiderjen by de tarieding fan plasmid DNA of genomysk DNA.Of of net DNase aktyf is tidens it tariedingsproses kin de reaksje maklik beynfloedzje.De tradisjonele metoade fan siedend yn in wetterbad kin brûkt wurde om DNase-aktiviteit te ynaktivearjen.Dit produkt befettet gjin DNase en protease, en fereasket gjin waarmtebehandeling foar gebrûk.Derneist kin dit produkt ek brûkt wurde yn molekulêre biologyske eksperiminten lykas RNase-beskermingsanalyse en RNA-sekwinsjeanalyse.
Storage Betingsten
It produkt kin wurde opslein by -25 ~ -15 ℃, jildich foar 2 jier.
Ynstruksjes
Dit is ien fan 'e mienskiplike metoaden foar it tarieden fan RNase A opslachoplossing.It kin ek wurde taret trochoare metoaden neffens de tradisjonele metoaden yn it laboratoarium of referinsjeliteratuer (lykasdirekt oplost yn 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 of Tris-NaCl-oplossing)
1. Brûk 10 mM natriumacetat (pH 5.2) om 10 mg / mL fan RNase A opslachoplossing te meitsjen
2. Ferwaarming op 100 ℃ foar 15 min
3. Koel nei keamertemperatuer, foegje 1/10 folume fan 1 M Tris-HCl (pH 7.4) ta, oanpasse de pH nei 7.4 (foarbygelyks, foegje 500 ml fan 10g/ml RNase opslach oplossing 1M Tris-HCL, PH7.4)
4. Sub-ferpakt by -20 ℃ foar beferzen opslach, dy't stabyl kin wêze oant 2 jier.
[Notysjes]: By it siedjen fan RNaseA-oplossing ûnder neutrale omstannichheden sil RNase-ôfslach foarmje;Kook it op in legere pH, en as der delslach is, kin it wurde waarnommen, wat kin wurde feroarsake troch de oanwêzigens fan proteïne ûnreinheden.As sedimint wurdt fûn nei it sieden, kinne ûnreinheden wurde fuortsmiten troch hege snelheid sintrifugering (13000rpm), en dan sub-ynpakt foar befriezing opslach.
Produkt Ynformaasje
| Synonimen | Ribonuklease I;Pankreatyske ribonuklease;Ribonuklease 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS nr. | 9001-99-4 |
| Ferskining | Wyt lyofilisearre poeder |
| Molekuul gewicht | ~ 13,7 kDa (aminosûrsekwinsje) |
| Ph wearde | 7.6 (aktiviteitsberik 6-10) |
| Geskikt temperatuer | 60 ℃ (aktiviteitsberik 15-70 ℃) |
| Aktivearjende agent | Na2+.K+ |
| Inhibitor | Rnase Inhibitor |
| Ynaktivearring metoade | Kin net ynaktiveare troch ferwaarming, it wurdt suggerearre om sintrifugekolom te brûken |
| Oarsprong | Bovine |
| Oplosberens | Oplosber yn wetter (10mg/ml) |
| Ferlies op droech | ≤5,0% |
| Enzym aktiviteit | ≥60 Kunitz ienheden/mg |
| Isoelektrysk punt | 9.6 |
Notysjes
Foar jo feiligens en sûnens, drage asjebleaft labjassen en wegwerphandschoenen foar operaasje.
